血根碱调节RhoA/ROCK信号通路对糖尿病性骨质疏松症大鼠骨代谢和炎性损伤的影响
周飞;易松;岳建彪;张上上;目的 探究血根碱调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关激酶（ROCK）信号通路对糖尿病性骨质疏松症大鼠骨代谢和炎性损伤的影响。方法 取60只健康雄性8周龄SD大鼠，分为正常组（未予任何处理）、模型组（腹腔注射60 mg/kg 0.2%链脲佐菌素+骨密度降低）、低剂量血根碱组（L-血根碱组）、高剂量血根碱组（H-血根碱组）、H-血根碱+抑制剂组，每组12只，L-血根碱组、H-血根碱组和H-血根碱+抑制剂组分别为造模成功大鼠予2.50 mg/（kg·d）血根碱灌胃+等量0.9%氯化钠注射液腹腔注射、6.25 mg/（kg·d）血根碱灌胃+等量0.9%氯化钠注射液腹腔注射、6.25 mg/（kg·d）血根碱灌胃+40 mg/（kg·d）Rhosin腹腔注射。各组大鼠处理8周后，使用双能X线吸收测定扫描系统测量骨密度；检测血清钙、骨钙素（OC）、骨保护素（OPG）、碱性磷酸酶（ALP）水平；行生物力学测试检测各组大鼠股骨最大载荷；HE染色观察各组大鼠胰腺组织病理学变化与股骨组织形态学；酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平；Western blot实验检测各组大鼠股骨组织RhoA、ROCK1和ROCK2蛋白表达。结果 与正常组相比，模型组大鼠骨密度和股骨最大载荷降低，胰岛和股骨组织被破坏，血清钙、OC、OPG含量及股骨组织RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达降低，血清ALP、IL-1β、TNF-α、IL-6水平升高（P<0.05）；与模型组相比，L-血根碱组、H-血根碱组大鼠骨密度和股骨最大载荷升高，胰岛和股骨组织损伤减轻，血清钙、OC、OPG含量及股骨组织RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达升高，血清ALP、IL-1β、TNF-α、IL-6水平降低，且H-血根碱组上述指标变化更显著（P<0.05）；与H-血根碱组相比，H-血根碱+抑制剂组逆转了血根碱对大鼠骨代谢和炎性损伤的影响。结论 血根碱通过激活RhoA/ROCK信号通路改善糖尿病性骨质疏松症大鼠骨代谢，并减轻了其炎性损伤。
雷公藤甲素对肝细胞癌的抑制机制探讨
王一鸣;赵丽丽;刘文婧;孙象军;目的 探讨雷公藤甲素（TPL）在肝细胞癌（LIHC）中的抗癌机制。方法 基于TCMSP、SuperPred、TCGALIHC及AnimalTFDB数据库，结合网络药理学与转录组学分析筛选TPL靶点，并通过分子对接验证其与Zeste同源物2多梳抑制复合物2亚基（EZH2）结合的能力。整合LIHC与TPL处理的Huh7细胞RNA测序数据，进行差异表达、相关性、预后及GSEA分析，并结合ChIP-Atlas与ATAC-seq数据评估CSRNP1表观调控特征。结果 EZH2被确定为TPL直接结合靶点（结合能为-7.186 8 kcal/mol）,LIHC患者EZH2与CSRNP1呈负相关（r=-0.37,P<0.001）。50 nmol/L TPL处理Huh7细胞48 h后，EZH2表达显著下调（P<0.01）,CSRNP1表达显著上调（P<0.01）。GSEA显示EZH2激活E2F靶基因通路、G2M检查点通路及MYC靶基因通路（P均<0.01）,CSRNP1高表达抑制MYC信号（NES=-1.47,P=0.009）。表观分析证实EZH2通过H3K27me3修饰沉默CSRNP1转录：LIHC细胞中，CSRNP1启动子区域富集H3K27me3修饰信号峰且无ATAC-seq信号，提示转录受抑；正常肝组织中该区域无H3K27me3修饰，且ATAC-seq信号显著，染色质可及性高，利于基因正常转录。结论 TPL通过抑制EZH2解除对CSRNP1的表观抑制，抑制MYC通路并改善免疫微环境，揭示EZH2-CSRNP1-MYC轴是TPL抗肝癌作用的重要机制，为肝癌治疗提供潜在靶点。
粉防己碱对胶质瘤细胞恶性表型的影响及分子机制探讨
郭玲娣;毛兴允;衡雪源;李瑞国;王辉;徐名;目的 探讨粉防己碱对胶质瘤细胞恶性表型的影响及分子机制。方法 基于TCGA、GEO、MSigDB和CTD数据库筛选胶质瘤中粉防己碱潜在结合的高表达蛋白编码基因，根据单基因GSEA通路分析筛选转化生长因子-β1(TGF-β1)下游通路；行CCK-8实验测定细胞活力，结晶紫染色测定克隆形成能力，流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率，划痕实验和Transwell实验评估细胞迁移侵袭能力；行RT-qPCR和Western blot实验检测上皮-间质转化（EMT）相关蛋白及Smad2-Snail通路调控因子表达；通过转染构建TGF-β1高表达和低表达细胞模型。结果 TGF-β1在胶质瘤患者肿瘤组织中高表达（P<0.05），且同患者不良预后相关，粉防己碱可潜在结合并抑制TGF-β1蛋白；粉防己碱显著抑制胶质瘤细胞U251和T98G细胞的增殖、迁移、侵袭活性，诱导细胞凋亡，并抑制EMT过程，阻断TGF-β1/Smad2-Snail通路激活（P<0.01）；下调TGF-β1表达可抑制胶质瘤细胞增殖，并诱导细胞凋亡（P<0.05,P<0.01）。结论 粉防己碱通过调控TGF-β1/Smad2-Snail轴抑制胶质瘤的EMT过程，为胶质瘤治疗提供了新的理论依据。
氧化苦参碱对急性一氧化碳中毒大鼠脑损伤的保护作用及潜在机制分析
高莹;张俊英;房娉平;刘岩刚;赵冬霞;目的 探究氧化苦参碱（OMT）对急性一氧化碳（CO）中毒大鼠脑损伤的保护作用及潜在机制。方法 选取100只健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠，标准实验室环境中适应性饲养，自然光照周期，自由摄取水和食物。饲养至第8日，随机分为空白对照组（NC组）、急性CO中毒模型组（CO组）、急性CO中毒模型辅以OMT治疗组（OMT组）及急性CO中毒模型联合OMT与SIRT1抑制剂治疗组（OMT+EX527组），每组25只大鼠。借由吸入CO气体构建急性CO中毒大鼠模型，OMT组接受OMT 200 mg/kg灌胃处理，OMT+EX527组予OMT 200 mg/kg与SIRT1抑制剂EX5271 mg/kg灌胃处理。通过进行Morris水迷宫实验来评估各组大鼠的学习与记忆能力；制备脑组织样本，行HE染色以检测各组大鼠脑组织形态，行TUNEL染色检测各组大鼠大脑细胞凋亡情况，采用透射电子显微镜观察各组大鼠神经细胞超微结构，借助流式细胞仪检测各组大鼠线粒体膜电位，采用活性氧试剂盒检测各组大鼠海马组织活性氧水平，通过Western blot实验分析各组大鼠海马组织SIRT1、FOXO1、Nrf-2及Bcl-2蛋白表达。结果 与CO组比较，OMT组大鼠逃避潜伏期缩短，且穿越平台次数显著增多（P<0.01）；与CO组和OMT+EX527组比较，OMT组大鼠脑组织细胞形态结构得以改善；与CO组和OMT+EX527组比较，OMT组大鼠TUNEL阳性细胞率降低（P<0.01）；与CO组和OMT+EX527组比较，OMT组大鼠海马区神经细胞平均荧光强度提升（P<0.01）;OMT组与CO组和OMT+EX527组比较，海马组织活性氧水平降低（P<0.01）;OMT组和CO组比较，海马组织SIRT1、FOXO1、Nrf-2、Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论 OMT或许通过激活SIRT1/FOXO1信号通路、改善神经细胞线粒体功能、减轻氧化应激损伤，从而对急性CO中毒大鼠的脑损伤起到保护作用。
3-甲氧基酪胺噬菌体抗体的制备及应用
张航;李娅娅;张伟涛;李松瑞;刘雅琳;田晓平;李桂林;姬国杰;胡焕焕;赵巧辉;目的 寻找能够特异性检测尿液中3-甲氧基酪胺的单克隆抗体，以满足3-甲氧基酪胺诊断试剂盒开发需要。方法 设计并合成3-甲氧基酪胺抗原，通过3-甲氧基酪胺偶联双琥珀酰亚胺辛二酸酯钠盐和钥孔血蓝蛋白免疫新西兰大白兔获取抗体库，基于噬菌体展示技术，通过固相淘选策略获得高亲和力噬菌体抗体，同时依靠标记生物素抗体包被磁微粒，结合辣根过氧化物酶标记抗原，验证抗体性能。结果 获得20株与3-甲氧基酪胺有较高亲和性的噬菌体抗体，经酶联免疫吸附试验效价测定从中筛选出效价和斜率最优的重组抗体4354#，并以重组抗体4354#偶联生物素为包被抗体，辣根过氧化物酶标记的经酰化3-甲氧基酪胺作为酶标抗原，通过磁微粒化学发光法验证重组抗体4354#可用于检测经酰化处理尿液中3-甲氧基酪胺的含量。测试结果与高效液相色谱法检测结果呈现正相关(R2=0.9021)。结论 通过噬菌体展示技术，成功筛选出针对3-甲氧基酪胺的重组抗体，并通过磁微粒化学发光法验证其可用于检测尿液中3-甲氧基酪胺的含量，为3-甲氧基酪胺诊断试剂盒原材料的开发奠定了基础。
膳食模式对尿石症发病风险及潜在机制的meta分析
张烟丽;滑丽美;陈玉洁;任建平;吴琼;李婷;目的 系统评价不同膳食模式与尿石症发病风险的关联性及其潜在机制。方法 利用PubMed、Web of Science、Embase、CNKI及万方数据库进行资料检索，搜集建库至2024年12月发表的关于膳食模式与尿石症发病风险关系的观察性研究。由两位学者分别独立完成文献筛选、资料搜集及评估研究的偏倚程度，运用Stata 17.0软件开展meta分析。结果 共计纳入17项研究，涵盖10项队列研究、5项病例对照研究及2项横断面研究，总样本量215 683例。meta分析结果显示，植物性膳食模式可降低尿石症发病风险（OR=0.83,95%CI:0.72,0.94），而动物性食物模式（OR=1.36,95%CI:1.25,1.47）和高糖甜食模式（OR=1.24,95%CI:1.06,1.46）则会增加尿石症发病风险。不同膳食模式对尿石症发病风险的影响可能与尿液酸碱度和关键成石物质（如钙、草酸、枸橼酸）的排泄变化有关。结论 植物性膳食模式是尿石症发病的保护因素，而动物性食物模式和高糖甜食模式是其危险因素。建议在尿石症一级预防中推广富含水果蔬菜的植物性膳食，适量限制动物蛋白和高糖食物摄入。
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